维生素B6的生物合成技术 收藏本需求
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动物营养与免疫的关系十分密切,在完善的饲养管理前提下,合理、平衡的日粮粗分对畜禽的生长、繁殖等生产性能的改善或提高至关重要。维生素是一种不同于脂肪、碳水化合物和蛋白质的有机化合物,主要对机体的生理功能和营养代谢起着重要的作用。维生素B6又称吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺三种易于转化的吡啶衍生物,市场上主要以盐酸吡哆醇形式出售。维生素B6在体内以磷酸酯形式存在,是人体和动物必需的一种水溶性维生素,其以辅酶形式参与氨基酸、糖原等多种代谢过程,从而影响机体的免疫应答能力。

1.技术需求。

整体提升维生素B6合成代谢流,通过酶工程和计算机辅助设计优化酶的空间结构进行代谢平衡研究,从而提高合成途径中酶的催化特性,提升其合成效率。

2.技术难点。

1)关键酶的理性改造。维生素B6合成途径中的关键酶均为多亚基酶,其复杂的空间结构、处在亚基界面上的活性区域和较为相似的竞争性底物等因素的存在使酶的理性改造难度增加,另外也存在较大的筛选工作量。

2)代谢平衡调控。维生素B6整体代谢流优化较难开展,可考虑借助于计算机辅助设计,平衡各基因的表达水平范围及调控元件的调节范围,理性设计维生素B6合成途径各个基因的表达范围,或改变酶的空间组织形式使得整个代谢途径无中间产物的积累,实现终产物的高效合成。

3.技术指标。

1)维生素B6合成过程中的两个前体通过关键酶pdxA基因产物(4-磷酸羟基苏氨酸脱氢酶)和pdxJ基因产物(吡哆醇5P磷酸合酶)的作用结合在一起,经随机突变或理性改造后形成吡哆醇-5P-磷酸的吡啶环,以上两种酶的活性与野生菌种合成途径中的对照酶相比提高10倍以上。

2)获取具有自主知识产权的工程发酵菌株,产量达10g/L以上。


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