本发明公开了一种酸性橙Ⅱ人工抗原合成的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)称取酸性橙Ⅱ,加入丙酮溶解,再加入丁二酸酐、无水吡啶,加热回流24h;(2)旋蒸除去丙酮,干燥后可见蒸馏烧瓶底部一层橙色,加DMF溶解,再加入NHS、DCC,室温下在磁力搅拌器上搅拌,获得反应液,离心,去沉淀,制成酸性橙Ⅱ活化中间产物;(3)称取BSA或OVA,溶于PBS中,在磁力搅拌器上边搅拌边将酸性橙Ⅱ活化中间产物逐滴加入到BSA-PBS或OVA-PBS溶液中,搅拌过夜;(4)次日将搅拌过夜的反应液置于透析袋中,在冰箱内以PBS中透析72h,每8h换透析液一次;(5)透析结束后,将透析袋内液体离心,去沉淀,即得酸性橙Ⅱ人工抗原。
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